傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗(yàn)證(SOP案例全文完整版)

目  錄

1、概述... 3

2、實(shí)施日期及時(shí)間安排... 3

3、驗(yàn)證小組成員... 3

4、儀器和設(shè)備... 3

5、材料與試劑... 3

6、驗(yàn)證過(guò)程... 4

7、驗(yàn)證結(jié)果記錄... 8

8、再驗(yàn)證周期... 9

9、相關(guān)SOP. 9

10、QA職責(zé)... 9

11、修改事項(xiàng)... 9

12、文檔... 9

1、概述

進(jìn)入凈化車間的零配件或其它物品通過(guò)傳遞窗，進(jìn)入微生物室的物品通過(guò)傳遞窗，經(jīng)過(guò)紫外消毒后進(jìn)入微生物室。為了確認(rèn)傳遞窗紫外燈的消毒效果，特起草方案對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證。本驗(yàn)證用于生產(chǎn)車間、微生物室、無(wú)菌室傳遞窗紫外燈表面消毒效果檢查。

2、實(shí)施日期及時(shí)間安排

2007年月日開(kāi)始進(jìn)行驗(yàn)證。

3、驗(yàn)證小組成員

4、儀器和設(shè)備

5、器材

5.1滅菌刻度吸管（1ml，10ml）

5.2滅菌試管

5.3滅菌平皿

5.4酒精燈

5.5載體：（1.0×1.0cm的玻片）

6、材料與試劑

6.1純化水 

6.2營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

6.3改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基

6.4營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基

6.5改良馬丁培養(yǎng)基

6.6金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]

6.7枯草芽孢桿菌[CMCC（B）63 501]

6.8大腸桿菌[CMCC（B）44 102]

6.9白色念珠菌[CMCC（F）98 001]

6.10稀釋液（0.1％吐溫80，0.1％蛋白胨溶液）

7、驗(yàn)證過(guò)程

7.1 試驗(yàn)環(huán)境

    試驗(yàn)在潔凈度10 000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，全過(guò)程嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。

    每次操作開(kāi)始前，開(kāi)紫外燈照射1小時(shí)。

7.2 培養(yǎng)基的制備

7.2.1營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
配方：

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉 31.0g

純化水            1000ml

配制：

根據(jù)需要量稱取營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉置適宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至7.1±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

7.2.2改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基
配方：

           改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉   42.0g

純化水                  1000ml

     配制：

根據(jù)需要量稱取改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

7.2.3營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基
配方：

           營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基   20g

純化水            1000ml

配制：

稱取營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20克，加1000ml純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

7.2.4改良馬丁培養(yǎng)基
配方：

           改良馬丁培養(yǎng)基粉   28.0g

純化水              1000ml

配制：

根據(jù)需要量稱取改良馬丁培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

7.4 方法驗(yàn)證試驗(yàn)

7.4.1輻照強(qiáng)度測(cè)定

7.4.1.1開(kāi)啟紫外燈5min后，用中心波長(zhǎng)為253.7nm的紫外線強(qiáng)度測(cè)定儀在燈管下方垂直1m的中心處測(cè)量其輻照度值（uW/cm²）。

7.4.1.2測(cè)量時(shí)，電壓應(yīng)穩(wěn)定在220V。

7.4.1.3普通型或低臭氧型直管紫外線燈（30W），在燈管下方垂直1m的中心處，新燈管的輻照度值應(yīng)≥90 uW/cm² 。使用中的燈管的輻照度值應(yīng)≥70 uW/cm² ，低于此值者應(yīng)予更換。

7.4.2照射劑量

表面消毒接受的照射劑量，應(yīng)達(dá)殺滅目標(biāo)微生物所需。對(duì)大腸桿菌，照射劑量應(yīng)達(dá)到7.5×10³ uW·s/cm²,對(duì)金黃色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢桿菌應(yīng)達(dá)到2.53×10⁴uW·s/cm²。

7.4.2.2照射劑量計(jì)算：

照射劑量（uW·s/cm² ）＝紫外燈管強(qiáng)度（uW/cm²）×時(shí)間（s）

7.4.3 細(xì)菌及其芽孢和真菌殺滅效果的測(cè)定

7.4.3.1菌液的制備   

金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌培養(yǎng)后，將菌液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。

7.4.3.2 將滅菌載體平放于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)載體滴注定量菌懸液，（載體回收菌量達(dá)5×10⁵～5×10⁶ cfu/片），涂勻，放37℃培養(yǎng)箱烘干。開(kāi)啟紫外燈5min后，將16個(gè)染菌玻片平放于滅菌平皿內(nèi)，水平放于適當(dāng)距離照射，于4個(gè)不同間隔時(shí)間（15min、30 min、45 min、60 min）各取出4個(gè)染菌玻片，分別投入4個(gè)盛有5ml洗脫液試管中，振打80次。

7.4.3.3經(jīng)適當(dāng)稀釋后，取1ml洗脫液，作平板傾注，每個(gè)染菌玻片接種兩個(gè)，細(xì)菌放30～35℃培養(yǎng)48小時(shí)作活菌計(jì)數(shù)，真菌放23～28℃培養(yǎng)72小時(shí)作活菌計(jì)數(shù)。

7.4.3.4陽(yáng)性對(duì)照，除不做照射處理外，取4個(gè)染菌玻片，分別投入4個(gè)盛有5ml洗脫液試管中，振打80次。余按7.4.2.3同樣操作。

7.4.3.5計(jì)算殺滅率

                          陽(yáng)性對(duì)照回收菌數(shù)－試驗(yàn)組回收菌數(shù)

     殺滅率（％）＝                                            ×100％

                               陽(yáng)性對(duì)照回收菌數(shù)

7.4.3.6判定標(biāo)準(zhǔn)     對(duì)指示菌殺滅率≥99.9％判為消毒合格。

8、驗(yàn)證結(jié)果記錄：

附件1. 試驗(yàn)菌數(shù)量測(cè)定原始記錄

8、再驗(yàn)證周期

傳遞窗構(gòu)造或紫外燈管放置位置發(fā)生改變時(shí)。

9、相關(guān)SOP

參考：自凈式傳遞窗驗(yàn)證過(guò)程中的性能確認(rèn)

10、文檔

所有的相關(guān)文檔都應(yīng)該保留至少5年，這些文檔應(yīng)包括如下內(nèi)容：

原始方案、修改后的方案（如果有的話）、偏差報(bào)告、原始數(shù)據(jù)、原始報(bào)告和最終報(bào)告、其中，報(bào)告應(yīng)該包括以下內(nèi)容：

記錄的原件（或復(fù)印件）、測(cè)試項(xiàng)目及條款、實(shí)驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束的日期、材料和方法描述、出現(xiàn)的偏差描述（如果有的話）、實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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